glenresearch 10-1536-02說(shuō)明書
更新時(shí)間：2021-06-23 點(diǎn)擊量：1182
glenresearch 10-1536-02說(shuō)明書
Fmoc 氨基改性劑 C6 dT
5'-二甲氧基三苯甲基-5-[N-((9-芴基甲氧基羰基)-氨基己基)-3-丙烯酰亞胺]-2'-脫氧尿苷,3'-[(2-氰乙基)-(N,N-二異丙基)]-亞磷酰胺
描述
我們的 NHS 酯衍生物系列已擴(kuò)展到包括 NHS-Carboxy-dT-CE Phosphoramidite。通過(guò)制備羧基修飾劑 C10 的 dT 類似物，可以標(biāo)記寡核苷酸內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)位點(diǎn)。當(dāng)亞磷酰胺不可用時(shí)，這開辟了在寡核苷酸內(nèi)標(biāo)記任意數(shù)量的不同染料或分子的可能性。這樣做很簡(jiǎn)單，可以在合成儀之外手動(dòng)完成，甚至可以在 DNA 合成儀上以全自動(dòng)方式完成。我們從未發(fā)現(xiàn)允許從氨基修飾劑中去除 TFA 基團(tuán)而寡核苷酸仍然附著在支持物上的條件。我們能夠通過(guò)使用 9-芴基甲氧基羰基 (Fmoc) 保護(hù)基團(tuán)來(lái)解決這個(gè)問(wèn)題。使用兩步程序去除 Fmoc 組，第一個(gè)步驟是使用 1% 二異丙胺的乙腈溶液去除氰乙基保護(hù)基團(tuán)并從合成柱中沖洗形成的丙烯腈，第二個(gè)步驟是使用 10% 哌啶的 DMF 溶液去除 Fmoc 基團(tuán)。在柱上如此形成的氨基可以與多種活化酯反應(yīng)。我們提供 Fmoc-Amino-Modifier C6 dT Phosphoramidite 作為核苷選項(xiàng)，提供 Amino-Modifier Serinol Phosphoramidite 作為非核苷選擇。我們還提供 S-Bz-硫醇改性劑 C6-dT 以加入用于寡核苷酸合成的硫醇改性劑行列。硫醇改性劑 C6-dT 可以像往常一樣添加到序列中的所需位置。在柱上如此形成的氨基可以與多種活化酯反應(yīng)。我們提供 Fmoc-氨基改性劑 C6 dT 亞磷酰胺作為核苷選項(xiàng)，氨基改性劑絲氨醇亞磷酰胺作為非核苷選擇。我們還提供 S-Bz-硫醇改性劑 C6-dT 以加入用于寡核苷酸合成的硫醇改性劑行列。硫醇改性劑 C6-dT 可以像往常一樣添加到序列中的所需位置。在柱上如此形成的氨基可以與多種活化酯反應(yīng)。我們提供 Fmoc-氨基改性劑 C6 dT 亞磷酰胺作為核苷選項(xiàng)，氨基改性劑絲氨醇亞磷酰胺作為非核苷選擇。我們還提供 S-Bz-硫醇改性劑 C6-dT 以加入用于寡核苷酸合成的硫醇改性劑行列。硫醇改性劑 C6-dT 可以像往常一樣添加到序列中的所需位置。
細(xì)節(jié)
用法
- 耦合：無(wú)需對(duì)合成器制造商推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行更改。
- 脫保護(hù)：為了在柱上標(biāo)記胺，依次用 1 ml 載體、10% 二乙胺/ACN（去除氰乙基保護(hù)）和 20% 哌啶/DMF 去除 Fmoc 保護(hù)10 分鐘。用 DMF 和 ACN 沖洗載體以去除哌啶。將 NHS 酯（過(guò)量 5-10 倍）溶解在 0.5 ml 含有 1% 二異丙基乙胺的適當(dāng)溶劑中，并在 35 oC 下用 CPG 孵育 2-4 小時(shí)以標(biāo)記胺。沖洗支架以去除多余的標(biāo)簽并正?；蛟谂c耦合標(biāo)簽兼容的條件下切割/去保護(hù)。
| 規(guī)格 |
|---|
| 沖淡 | 無(wú)水乙腈 |
| 貯存 | 冷凍儲(chǔ)存，-10 至 -30°C，干燥 |
| 穩(wěn)定 | 2-3天 |
稀釋/偶聯(lián)數(shù)據(jù)
下表顯示了包裝尺寸數(shù)據(jù)，以及基于正常啟動(dòng)程序的溶液稀釋和近似耦合。
ABI 392/394
| 目錄 ＃ | 包裝尺寸 | 克/包 | 0.1M 刻度 (毫升) | 添加的大約數(shù)量 |
|---|
| | LV40 | LV200 | 40納米 | 0.2μm | 1μm | 10μm |
|---|
| 10-1536-02 | 0.25 克 | .25 克 | 2.23 | 61 | 36.6 | 22.88 | 16.64 | 12.2 | 3.05 |
| 10-1536-90 | 100 微摩爾 | .112克 | 1 | 20 | 12 | 7.5 | 5.45 | 4 | 1 |
加快
| 目錄 ＃ | 包裝尺寸 | 克/包 | 稀釋（毫升） | 添加的大約數(shù)量 |
|---|
| | 摩爾濃度 | 50納米 | 0.2μm | 1μm | 15μm |
|---|
| 10-1536-02 | 0.25 克 | .25 克 | 3.33 | 0.07 | 60.2 | 37.63 | 27.36 | 3.76 |
| 10-1536-90 | 100 微摩爾 | .112克 | 1.5 | 0.07 | 23.6 | 14.75 | 10.73 | 1.48 |
